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微流控單細胞包封系統
點(diǎn)擊次數:622 更新時(shí)間:2022-12-07
 

微液滴的單細胞包封是采用微流控系統生成微液滴進(jìn)行單細胞包封的技術(shù),采用壓力控制器驅動(dòng)的微流控裝置可生產(chǎn)皮升級大小的液滴,可在單細胞水平上進(jìn)行Hela等細胞的包封及進(jìn)一步的分析。Elveflow 提供微流控單液滴包封的全套儀器設備及相關(guān)的用戶(hù)指導手冊,用于微液滴的單細胞包封及單細胞測序。

微流控單細胞包封的應用包括:

腫瘤學(xué)(洞察小細胞亞群攜帶的突變)

免疫學(xué)(區分不同的免疫細胞群或表征免疫細胞群)

神經(jīng)學(xué)(獲取詳細的單細胞圖譜,以了解和識別大腦中不同類(lèi)型的神經(jīng)元及其連接分子)

發(fā)育生物學(xué)(逐個(gè)細胞繪制胚胎的整個(gè)發(fā)育過(guò)程)

單細胞組學(xué)(揭示組織樣本的細胞異質(zhì)性)

Elveflow 采用微液滴進(jìn)行單細胞包封的儀器配置如下:

  1. OB1 壓力控制器,至少有兩個(gè)      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量傳感器,0.4–7 μL/min,用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量傳感器      4.2–80 μL/min,用于細胞懸液

  4. 1 x 套件魯爾鎖啟動(dòng)連接件

  5. 2 x 15 mL 儲液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于觀(guān)察的顯微鏡

  8. 用于成像的攝像頭(可選)

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性劑

  10. Aquapel用于疏水處理(可選)

微流控芯片是微液滴單細胞包封的關(guān)鍵部件,可采用流動(dòng)聚焦的微流控微液滴生成芯片,材質(zhì)是PDMS ,微通道可以用Aquapel進(jìn)行處理,形成疏水性的微流體通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片,可獲得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片,可獲得50-80μm的液滴

單細胞包封微流控芯片,生成20-50 μm的液滴。

這些芯片有2個(gè)入口,1個(gè)出口,入口分別是細胞懸浮液和油相,可實(shí)現單細胞包封。

如果想進(jìn)行單細胞包封后測序,可采用4個(gè)入口和1個(gè)出口的微流控芯片,4個(gè)入口分別用于細胞懸浮液,Barcoded 水凝膠珠,裂解緩沖液和油相。

例如采用細胞溶液,13.57X105細胞/ml, 生微液滴平均直徑為51.2μmCV=2.4%)。

參考文獻:Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 



 
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